瓜伊多1983年出生于委内瑞拉巴加斯州（现为拉瓜伊拉州）首府拉瓜伊拉。2007年，他在委内瑞拉安德烈斯·贝略天主教大学获得工业工程学位。2009年，瓜伊多参与创建人民意志党。2018年12月，瓜伊多被选为反对派控制的委内瑞拉议会主席，并于2019年1月5日宣誓就职。
2018年5月，马杜罗在委内瑞拉总统大选中成功连任，但美国以“民主”和“人权”为幌子，拉拢盟友，与委反对派一起，拒绝承认马杜罗政府的合法性。2019年1月23日，瓜伊多当上议会主席没多久，便自封为“临时总统”。当天，美国宣布承认瓜伊多自封的身份，并对他公开表示支持。马杜罗随即宣布委内瑞拉与美国断交。
为逼迫马杜罗下台，美国一方面给瓜伊多搭台，为其提供资助，另一方面以外交孤立、经济制裁和军事威胁等手段向马杜罗政府施压，目的是将瓜伊多扶上台。在美国裹挟下，50多个国家及欧盟陆续承认瓜伊多的所谓“合法总统身份”。
事实上，美国对瓜伊多这类“代理人”的物色和培养很早就已经开始。据中国外交部公布的《关于美国国家民主基金会的一些事实清单》披露，在1999年查韦斯就任委内瑞拉总统后，美国国家民主基金会（NED）就加紧暗箱操作，持续向委内瑞拉反对派提供资金，以邀请人员访美形式组织集中培训。2005年，瓜伊多等5名委“学生领袖”就曾接受NED资助，参加所谓“起义”训练。瓜伊多随后在美留学进修期间，也一直在NED支持下活跃在美国相关政治团体中。
事实证明，美方的培训确有“针对性”。2019年4月30日凌晨，瓜伊多出现在委首都加拉加斯东部一处空军基地附近。瓜伊多在社交媒体上号召军人和民众走上街头，企图煽动军事政变。
当天，时任美国国务卿蓬佩奥在社交媒体上为瓜伊多摇旗呐喊：“临时总统瓜伊多宣布开始自由行动。美国政府全力支持委内瑞拉人民追求自由和民主。”
美国前总统国家安全事务助理博尔顿2022年5月在一场智库活动中谈及美国对马杜罗政府的颠覆行动。他说：“唯一的遗憾是我们没有成功，尽管我们很接近。”
军事政变没成功，瓜伊多领导的“临时政府”又在美国支持下试图发动“颜色革命”，煽动年轻人举行针对马杜罗政府的暴力抗议活动，一度给委安全稳定带来严重冲击。据委官方统计，2019年上半年，持续数月的暴力抗议在这个南美国家造成数百人伤亡，经济损失高达上百亿美元。
持续的暴力活动没有实现推翻马杜罗政府的目标。随着瓜伊多几次夺权尝试均以失败告终，他在委反对派内部的支持率持续下降，美国国内不少人也开始质疑在他身上“下注”是否明智。2022年，随着乌克兰局势升级，全球能源供应紧张，价格飙涨，美国注意力转向，对瓜伊多的态度发生转变。
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